【Utilisation prévue 】

Le kit total 25OH Vitamine D (immunofluorescence) est principalement destiné à la mesure quantitative in vitro des 25-hydroxyvitamines D2 et D3 (25OH-D2 et 25OH-D3) dans le sérum et le plasma. Il est utile pour aider à la gestion et à la surveillance de la régulation de la concentration de calcium et de phosphate dans le sang et pour favoriser la croissance saine et le remodelage des os. La vitamine D 25OH pourrait également être active dans d’autres tissus responsables du transport du calcium (placenta, rein, glande mammaire…) et des glandes endocrines (glandes parathyroïdes, cellules bêta…).

La vitamine D est le terme générique utilisé pour désigner la vitamine D2 et la vitamine D3. Les humains produisent naturellement de la vitamine D3 lorsque la peau est exposée aux rayons ultraviolets du soleil. Dans le foie principalement, la vitamine D3 est métabolisée en 25-hydroxyvitamine D3 (25OH-D3), qui est la principale forme de vitamine D circulant dans l'organisme. La vitamine D3 et la vitamine D2 sont également disponibles par ingestion via des aliments ou des compléments alimentaires.

La carence en vitamine D est un facteur de risque important de rachitisme, d’ostéomalacie, d’ostéoporose sénile, de cancer et d’issues de grossesse. Il a été démontré que l’intoxication à la vitamine D provoque des lésions rénales et tissulaires.

【Principe du test 】

Le test utilise une méthode d'immunodétection compétitive. Ajoutez l’échantillon dans le puits d’échantillon de la cartouche. Par chromatographie, l'échantillon réagit avec les particules de latex fluorescentes recouvertes d'anticorps monoclonal sur le tampon conjugué. Le complexe se propage le long de la membrane de nitrocellulose capturé par le couple covalent de 25OH-D3 et d'albumine sérique bovine (BSA) sur la ligne de test. Plus l’échantillon contient de matériau cible, moins la ligne de test accumule de complexes. L'intensité du signal d'anticorps fluorescent reflète la quantité de 25OH-D2/D3 capturée. L'analyseur quantitatif d'immunofluorescence produit par notre société peut détecter la concentration de 25OH-D2/D3 dans l'échantillon.

【Forfait 】

25 Tests /Boîte

【Matériel fourni 】

Contenu

25 cartouches

1 carte d'étalonnage

25 Diluant

1 flacon de tampon de libération

【Accessoires obligatoires mais non fournis 】

² Analyseur quantitatif d'immunofluorescence (NRM-FI-1000)

² Incubateur de bandelettes réactives

² Contrôle de la vitamine D 25OH

【Stockage et stabilité】

² Scellé : Le kit doit être conservé à 10-30℃, valable 18 mois.

² Ouvert : La cartouche doit être utilisée dans l'heure qui suit l'ouverture de son sachet aluminium. Le diluant ouvert et le tampon de libération sont stables pendant 12 mois entre 2 et 8 °C s'ils sont conservés bouchés dans le récipient d'origine et exempts de contaminations.

【Avertissements et précautions】

Pour usage diagnostique in vitro.

La notice d’emballage doit être soigneusement suivie. La fiabilité des résultats des tests ne peut pas être garantie en cas d'écart par rapport à la notice.

Précautions de sécurité

ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons humains. Il est recommandé que tous les matériaux d'origine humaine soient considérés comme potentiellement infectieux et soient manipulés conformément à la norme OSHA sur les agents pathogènes transmissibles par le sang. Le niveau de biosécurité 211 ou d'autres pratiques de biosécurité appropriées doivent être utilisés pour les matériaux qui contiennent ou sont soupçonnés de contenir des agents infectieux.

Des mesures de protection appropriées doivent être prises lors de la collecte, du traitement, du stockage, du mélange de l'échantillon et du processus de test ; une fois que l'échantillon et le réactif entrent en contact avec la peau, laver abondamment à l'eau ; en cas d'irritation ou d'éruption cutanée, consulter un médecin.

Les échantillons, les cartouches usagées et les embouts jetables peuvent être potentiellement infectieux. Des méthodes appropriées de manipulation et d'élimination doivent être établies par le laboratoire conformément aux réglementations locales.

Précautions d'emploi

N'utilisez pas le kit au-delà de la date de péremption. La date de production et la date de péremption figurent sur l'étiquette.

Différents lots de réactifs, cartes d'étalonnage et cartouches ne peuvent pas être mélangés.

La cartouche est jetable et ne peut pas être réutilisée.

Veuillez ne pas utiliser de kit ou de cartouche visiblement endommagés.

N'insérez pas la cartouche mouillée par d'autres liquides dans l'analyseur, afin de ne pas endommager et polluer l'instrument.

Veuillez éviter les températures élevées dans le laboratoire.

La carte d'étalonnage et l'analyseur quantitatif d'immunofluorescence doivent rester à l'écart de l'environnement vibratoire et électromagnétique lors de leur utilisation. Une légère vibration de l’instrument est normale. Ne retirez pas la cartouche pendant le test.

Pour éviter toute contamination, portez des gants propres lorsque vous utilisez des kits de réactifs et des échantillons.

Pour une discussion détaillée des précautions de manipulation pendant le fonctionnement du système, reportez-vous aux informations de service NORMAN.

【Collecte et préparation des échantillons 】

Le sérum doit être collecté par des tubes standards ou un tube pro-coagulation rempli à l'intérieur de gel de séparation. Il est conseillé de tester l'échantillon immédiatement. Le sérum doit être conservé entre 2 et 8 ℃ ; Si le test est retardé de plus de 24 heures, stockez l'échantillon à -20 ℃ ou moins.

Les échantillons inactivés par la chaleur et hémolysés doivent être abandonnés. En cas de précipitation dans le sérum, une centrifugation doit être effectuée avant le test.

Les échantillons doivent atteindre la température ambiante (10-30℃) avant le test. L’échantillon cryoconservé ne peut être utilisé qu’après fusion complète, réchauffement et mélange. Évitez de répéter la congélation et la décongélation des échantillons.

【Procédure 】

Préparation

Installation de l'analyseur quantitatif d'immunofluorescence （NRM-FI-1000 ）et de l'incubateur

Veuillez lire attentivement le manuel d'utilisation de l'analyseur quantitatif d'immunofluorescence (NRM-FI-1000) et de l'incubateur de bandelettes réactives avant utilisation.

Installation de la carte d'étalonnage

Chaque boîte contient une carte d'étalonnage spécifique au lot pour corriger les écarts d'un lot à l'autre.

Allumez l'interrupteur d'alimentation, conformément à l'invite d'auto-test du système, en attendant que l'instrument affiche l'interface principale.

Appuyez sur « Gestion des tests ».

Insérez la carte d'étalonnage dans la fente pour carte en suivant le sens de la flèche, puis appuyez sur « Lire ». Confirmez le numéro de lot de la carte d'étalonnage avec les informations pertinentes sur le réactif, puis appuyez sur « Ok ».

Appuyez sur « Retour » à l’interface principale.

Cartouche

La cartouche doit atteindre la température ambiante avant d'être ouverte.

Procédure de test

1. Transférez 90 μL de tampon de libération à l’aide d’une pipette de transfert dans un tube de diluant.

2. Ajouter 10 μL d'échantillon (sérum/plasma humain) à l'aide d'une pipette de transfert dans le tube de diluant contenant le tampon de libération et bien mélanger en pipetant 10 fois.

3. Laissez le tube dans le bloc tubulaire pendant 5 min.

4. Retirez la cartouche (après avoir atteint la température ambiante), aspirez 90 µL du mélange incubé dans le puits et incubez-le pendant 10 minutes dans l'incubateur à bandelettes réactives.

5. Après l'incubation, insérez la cartouche dans l'analyseur quantitatif d'immunofluorescence (NRM-FI-1000) en utilisant les flèches de la cartouche comme guide, puis cliquez sur Démarrer, l'instrument numérisera automatiquement la cartouche.

Prudence

Veuillez vérifier le sens de la cartouche avant l'insertion et vous assurer que l'insertion est correcte.

Dilution

Si un échantillon contenant de la vitamine D est supérieur à la limite du kit de 60 ng/mL et qu'un résultat définitif est requis, l'échantillon doit être dilué manuellement avec une solution saline normale, puis ré-analysé conformément à la procédure de test. Le taux de dilution maximum valide est de 2 fois, la limite de détection est de 120 ng/mL.

Analyse des résultats

L'analyseur calcule automatiquement la concentration en vitamine D dans chaque échantillon au moyen d'une courbe d'étalonnage. Les résultats sont exprimés en ng/mL. Pour plus d'informations, veuillez vous référer au manuel d'utilisation de l'analyseur quantitatif d'immunofluorescence (NRM-FI-1000).

【Explication des résultats 】

Le résultat du test est uniquement à titre de référence et doit être pris en compte de manière globale en conjonction avec les symptômes cliniques, les antécédents médicaux et d'autres tests de laboratoire, etc. Le résultat ne peut pas servir de seul facteur de diagnostic clinique.

Toutes les opérations doivent être strictement conformes aux procédures opérationnelles pour obtenir le résultat correct. L'exactitude des résultats des tests peut être affectée par toute modification des procédures opérationnelles.

【Calibrage et traçabilité 】

Étalonnage

Chaque lot de kits contient des informations d'étalonnage spécifiques, stockées dans la carte d'étalonnage.

Traçabilité

Le kit total 25OH Vitamine D est traçable à un étalon interne fabriqué à partir d'un matériau hautement purifié.

【Contrôle qualité 】

L'exigence de contrôle recommandée pour le kit total 25OH Vitamine D est que l'échantillon de contrôle soit testé 3 fois. Des contrôles supplémentaires peuvent être testés conformément aux réglementations locales, étatiques et/ou fédérales ou aux exigences d'accréditation et à la politique de contrôle qualité de votre laboratoire. Si un contrôle se situe en dehors de la plage spécifiée, les résultats de test associés ne sont pas valides et les échantillons doivent être retestés.

Chaque laboratoire doit établir ses propres critères basés sur les paramètres suivants :

Chaque nouveau lot.

Chaque nouvel envoi (même s'il provient du même lot précédemment reçu).

Chaque nouvel opérateur (une personne qui n'a pas effectué les tests depuis au moins deux semaines).

Mensuellement, pour un contrôle continu des conditions de stockage.

Chaque fois que des problèmes (stockage, opérateur ou autre) sont identifiés

Ou à d’autres moments requis par les procédures de contrôle qualité standard de votre laboratoire.